Mutacje JAK2 Exon 12 w przypadku czerwienicy purpurowej i idiopatycznej erytrocytozy ad 7

W przypadku braku stymulacji erytropoetyną wszystkie mutanty były konsekwentnie związane ze zwiększonym poziomem Jak2 i Stat5 fosforylowanego tyrozyną, w porównaniu z typem Jak2 typu dzikiego (Figura 3B). Co więcej, trzy allele zawierające podstawienie K539L wszystkie generowały konsekwentnie wyższe poziomy fosforylowanego Jak2 niż te z mutacją V617F (Figura 3B). Mutanty egzonów 12 konstytutywnie aktywowały szlak sygnałowy Ras-ERK, wytwarzając poziomy ufosforylowanych Erk1 i Erk2, które były znacznie wyższe niż te otrzymane dla Jak2 typu dzikiego i wyższe niż te uzyskane dla V617F Jak2 (Figura 3C). Podsumowując, po transdukcji do komórek BaF3 / EpoR, wszystkie cztery mutacje eksonu 12 Jak2 powodowały nadwrażliwość czynnika wzrostu i aktywowane szlaki biochemiczne związane z przekazywaniem sygnałów przez erytropoetynę. Retrowirusowy transfer Mutacji Jak2 do myszy
Figura 4. Figura 4. Fenotyp mieloproliferacyjny, wynikający z retrowirusowej ekspresji K539L Jak2, w mysim modelu przeszczepu szpiku kostnego. Panel A pokazuje średni (. SD) hematokryt, liczbę białych krwinek i liczbę płytek we krwi obwodowej u myszy BALB / c biorców z ekspresją szpiku kostnego typu dzikiego, V617F lub K539L Jak2. Myszy (pięć w każdej grupie) oceniano 38 dni po transplantacji. Wartości P są pokazane dla porównania z biorcami typu dzikiego Jak2. Panele B, C i D (hematoksylina i eozyna) wykazują reprezentatywne rozmazy krwi obwodowej od myszy 38 dni po transplantacji.
Aby ocenić wpływ mutacji egzonu 12 in vivo, mysie komórki szpiku kostnego transdukowano wektorami retrowirusowymi kodującymi dzikiego typu V617F lub K539L Jak2, a następnie przeszczepiono do letalnie napromieniowanych myszy BALB / c, które są szczególnie podatne na rozwój zaburzenia mieloidalne po przeniesieniu mutanta V617F.8 Pięć tygodni po transplantacji zwierzęta, które otrzymały transdukcję komórek szpiku V617F miały erytrocytozę i leukocytozę (Figura 4A), wyniki, które są zgodne z poprzednimi obserwacjami, 8 jak również umiarkowaną trombocytozę. Odbiorcy transdukowanych komórek K539L również mieli podwyższony hematokryt, retikulocytozę i leukocytozę oraz niewielką trombocytozę (figura 4). Zgodnie z ludzkimi fenotypami związanymi z mutacjami eksonów 12 i V617F, średnie liczby białych i płytek krwi były niższe u biorców transdukowanych komórek K539L niż u biorców transdukowanych komórek V617F (odpowiednio P = 0,005 i P = 0,07). Analiza sortowanych komórek aktywowanych fluorescencją komórek szpiku kostnego od tych myszy wykazała, że w porównaniu z transdukowanymi komórkami typu dzikiego Jak2, komórki transdukowane K539L prowadziły do ekspansji linii erytroidalnych i granulocytarnych, ale nie do limfocytów T, limfocytów B lub megakariocytów. (dane nie pokazane).
Dyskusja
Zidentyfikowaliśmy charakterystyczny zespół mieloproliferacyjny związany z mutacjami egzonu 12 JAK2 o zwiększonej funkcji, który obejmuje pacjentów, u których obecnie diagnozuje się czerwienicę prawdziwą lub idiopatyczną erytrocytozę. Pacjenci z mutacjami eksonów JAK2 obecnymi w erytrocytozie, niskim poziomie erytropoetyny w surowicy i charakterystycznym histologicznym wyglądem szpiku kostnego. Podobnie jak w innych chorobach mieloproliferacyjnych, prekursory erytrocytów niezależne od erytropoetyny można hodować z komórek krwi obwodowej, a u niektórych pacjentów obserwowano nieprawidłowości cytogenetyczne, splenomegalię lub transformację do mielofibrozy.
[podobne: aspen fraxiparine, informacja o dostępności leków w aptekach, choroby genetyczne przykłady ]
[patrz też: korona pełnoceramiczna cena, informacja o dostępności leków, dermatolog nfz kraków ]