Mutacje JAK2 Exon 12 w przypadku czerwienicy purpurowej i idiopatycznej erytrocytozy

Mutacja V617F, która powoduje podstawienie fenyloalaniny za walinę w pozycji 617 genu kinazy Janus (JAK) 2 (JAK2), jest często obecna u pacjentów z czerwienicą prawdziwą, nadpłytkowością samoistną i idiopatyczną zwłóknieniem szpiku. Jednak podstawy molekularne tych zaburzeń mieloproliferacyjnych u pacjentów bez mutacji V617F są niejasne. Metody
Poszukiwaliśmy nowych mutacji w cząsteczkach JAK i przetworniku sygnałowym oraz aktywatorze rodzin genów transkrypcyjnych (STAT) u pacjentów z niedoborem czerwienicy V617F lub idiopatyczną erytrocytozą. Mutacje scharakteryzowano biochemicznie i w mysim modelu przeszczepu szpiku kostnego.
Wyniki
Zidentyfikowaliśmy cztery mutacje somatycznych przyrostów funkcji wpływające na ekson 12 JAK2 u 10 pacjentów z ujemnym V617F. Osoby z mutacją eksonową 12 JAK2 prezentowały wyizolowaną erytrocytozę i charakterystyczną morfologię szpiku kostnego, a kilka z nich miało również obniżone poziomy erytropoetyny w surowicy. Kolonie Erythroid mogły być hodowane z próbek krwi pod nieobecność egzogennej erytropoetyny. Wszystkie takie kolonie erytroidalne były heterozygotyczne pod względem mutacji, podczas gdy kolonie homozygotyczne pod względem mutacji występują u większości pacjentów z czerwienicą prawdziwą V617F-dodatnią. Komórki BaF3 eksprymujące mysi receptor erytropoetynowy, a także niosące mutacje eksonu 12 mogą proliferować bez dodatku interleukiny-3. Wykazali także zwiększoną fosforylację JAK2 i regulowanej zewnątrzkomórkowo kinazy i 2, w porównaniu z komórkami transdukowanymi JAK2 lub V617F JAK2 dzikiego typu. Trzy z mutacji egzonu 12 obejmowały substytucję leucyny dla lizyny w pozycji 539 JAK2. Mutacja ta spowodowała fenotyp mieloproliferacyjny, w tym erytrocytozę, w mysim modelu retrowirusowego przeszczepu szpiku kostnego.
Wnioski
Mutacje eksonowe 12 JAK2 definiują charakterystyczny zespół mieloproliferacyjny, który dotyka pacjentów, którzy obecnie otrzymują diagnozę czerwienicy prawdziwej lub idiopatyczną erytrocytozę.
Wprowadzenie
Zaburzenia mieloproliferacyjne obejmują spektrum przewlekłych chorób hematologicznych, które prawdopodobnie powstają w wyniku zmutowanych multipotencjalnych hematopoetycznych komórek macierzystych.1,2 Mutacja somatyczna V617F w genie kinazy Janus (JAK) 2 (JAK2), która powoduje podstawienie fenyloalaniny walina w pozycji 617, ostatnio stwierdzono u większości pacjentów z czerwienicą prawdziwą, a u wielu z niezbędną nadpłytkowością lub idiopatyczną mielofibrozą. 3-7 Ten gen koduje cytoplazmatyczną kinazę tyrozynową. Mutacja, która występuje w negatywnej domenie regulatorowej JAK homologii 2 (JH2), zwiększa aktywność kinazy JAK2 i powoduje niezależny od cytokin wzrost linii komórkowych i hodowanych komórek szpiku kostnego. Zmutowane JAK2 transfekowane do mysich komórek szpiku kostnego wywołuje erytrocytozę i następnie mielofibrosę u zwierząt biorców, 3,8,9 co sugeruje przyczynową rolę dla mutacji.
W celu wykrycia mutacji V617F u około 95% pacjentów z czerwienicą prawdziwą i u 50-60% pacjentów z nadpłytkowością samoistną lub idiopatyczną mielofibrozą można zastosować allelospecyficzną reakcję łańcuchową polimerazy (PCR). 4,10,11 Mutacja jest również obecne w hematopoetycznych komórkach progenitorowych odpowiedzialnych za różnicowanie granulocytowe lub erytroidalne4,12 oraz w oczyszczonych hematopoetycznych komórkach macierzystych od pacjentów z czerwienicą prawdziwą.13 Wielu pacjentów z czerwienicą prawdziwą lub idiopatyczną mielofibrozą jest homozygotami pod względem mutacji V617F, w wyniku rekombinacji mitotycznej wpływającej na chromosom 9p, 3-6, ale homozygotyczność występuje rzadko u pacjentów z nadpłytkowością samoistną.12 Mutacja występuje rzadko u pacjentów z mielodysplazją lub ostrą białaczką szpikową, ale nie występuje u pacjentów z guzami limfatycznymi, nowotworami nabłonkowymi lub mięsakami.14-18
Mutacja JAK2 pozwala na rozróżnienie dwóch podtypów idiopatycznej mielofibrozy i nadpłytkowości samoistnej. 19-21 Fenotyp nadciśnienia tętniczego istotnego dla V617F, ale nie V617F-ujemny, przypomina nadmiar policytemii.20 Jednak pacjenci z istotnym ujemnym V617F nadpłytkowość ma nieprawidłowości cytogenetyczne, dysplastyczne megakariocyty i ryzyko transformacji do mielofibrozy lub ostrej białaczki szpikowej, z których wszystkie są cechami zaburzenia mieloproliferacyjnego.20 Aktywne mutacje w receptorze trombopoetyny odnotowano u 10% pacjentów z ujemnym V617F idiopatyczna mielofibroza22 oraz u kilku pacjentów z nadpłytkowością samoistną.23 Jednak podstawa molekularna niedoboru czerwienicy V617F jest nieznana.
Metody
Pacjenci
Zrekrutowaliśmy pacjentów ze szpitala Addenbrooke w Cambridge, St.
[więcej w: testosteron sterydy cena, pobieranie materiału do badań laboratoryjnych, art dental ]
[podobne: choroby genetyczne przykłady, aspen fraxiparine, diuramid ]