Wykrywanie HIV w próbkach z nowonarodzonych programów badań przesiewowych

Z ostatnich doniesień wynika, że wykrycie zakażenia ludzkim wirusem upośledzenia odporności (HIV) u noworodków (dzieci w wieku poniżej miesiąca życia) jest możliwe, 2 3 4 5 6 7 8, chociaż nie tak wiarygodne jak u starszych dzieci, dzieci i dorosłych. 1, 3, 7, 8 Istnieją pewne dowody na to, że noworodki, których zakażenie HIV można wykryć w pierwszym miesiącu życia, będą miały szybszy postęp choroby.1, 7 Liczba zakażonych noworodków w połączonych sprawozdaniach jest niewielka, ponieważ krew od noworodka okres jest rzadko dostępny do czasu potwierdzenia zakażenia wirusem HIV. Zastosowaliśmy wykazaną czułość reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR) na wykrycie wirusa HIV w próbkach z papierowych bibuł filtracyjnych6, 9 w celu zbadania zestawu wysuszonych plamek krwi (kart Guthrie) uzyskanych rutynowo od noworodków w średnim wieku trzech dni. Pobraliśmy próbki od 42 dzieci urodzonych w latach 1986-1990, których infekcje wirusem HIV są obecnie znane.
Specyficzny dla HIV gag ukierunkowany na PCR, opisany przez Rogers i wsp., przeprowadzono w trzech powtórzeniach z kwasem nukleinowym ekstrahowanym metodą Cassol i wsp. 9 z 88 mm2 plamek krwi z bibuły filtracyjnej. Metoda wykrywania i kryteria pozytywnego wyniku były takie, jak opisano wcześniej, 8 z pozytywną kontrolą o niskiej liczbie kopii (10 i 40 kopii na mikrogram DNA), której sygnał wskazywał dodatnią linię podstawową. Wiedzieliśmy, że pracujemy na granicy czułości testu, ponieważ w 54 potrójnych zestawach z badań i próbnych próbek było 8 zestawów pozytywnych pod względem PCR z tylko jedną lub dwiema dodatnimi amplifikacjami. Podobne wyniki zaobserwowano w zestawach biegłości próbek o małej liczbie kopii (. 10 kopii na mikrogram DNA).
Testy przeprowadzono na ślepo na próbkach od 42 dzieci z zakażeniem wirusem HIV i 77 przypuszczalnie niezakażonych dzieci, których plamy krwi były przechowywane w fizycznym kontakcie z zakażonymi dziećmi. Swoistość wyników PCR została potwierdzona negatywnymi wynikami we wszystkich próbkach od 77 niezakażonych dzieci. DNA prowirusowe HIV wykryto w próbkach od 8 z 11 niemowląt (73 procent), które zmarły na zespół nabytego niedoboru odporności (AIDS) oraz w próbkach od 14 z 21 niemowląt (67 procent), u których AIDS rozwinęło się w wieku 18 lat. miesięcy. Spośród pozostałych 21 niemowląt, u których progresja choroby była mniej agresywna, 9 (43 procent) miało nowonarodzone próbki, które były pozytywne w PCR.
Takie wykorzystanie archiwalnych próbek przesiewowych noworodków pokazuje możliwość wczesnej identyfikacji dzieci z zakażeniem wirusem HIV. Niemowlętom z szybkim postępem choroby najbardziej prawdopodobne było posiadanie nowonarodzonych próbek, które były pozytywne w PCR, ale nawet u noworodków z wolniejszym postępem choroby 43 procent można było zidentyfikować przy urodzeniu. Wczesna identyfikacja zakażonych niemowląt metodą PCR może pozwolić na wczesną, agresywną interwencję. W badaniach populacyjnych10 ta technika może dać wczesne oszacowanie współczynników transmisji pionowej.
Anne Marie Comeau, Ph.D.
Ho-Wen Hsu, MD
Mark Schwerzler, BA
Galina Mushinsky, MS
George F. Grady, MD
Program badań przesiewowych noworodków w Nowej Anglii, Jamaica Plain, MA 02130
10 Referencje1. Rogers MF, Ou CY, Rayfield M, i in . Zastosowanie reakcji łańcuchowej polimerazy do wczesnego wykrywania prowirusowych sekwencji ludzkiego wirusa upośledzenia odporności u niemowląt urodzonych przez matki seropozytywne. N Engl J Med 1989; 320: 1649-54.
Full Text Web of Science MedlineGoogle Scholar
2. Krivine A, Yakudima A, Le May M, Pena Cruz V, Huang AS, Mclntosh K. Porównawcze badanie izolacji wirusa, reakcji łańcuchowej polimerazy i wykrywania antygenu u dzieci matek zakażonych ludzkim wirusem niedoboru odporności. J Pediatr 1990; 116: 372-6.
Crossref Web of Science MedlineGoogle Scholar
3. Escaich S, Wallon M, Baginski I, i in. . Porównanie wykrywania HIV przez izolację wirusa w hodowlach limfocytów i amplifikację molekularną DNA HIV i RNA metodą PCR u potomstwa matek seropozytywnych. J Acquir Immune Defic Syndr 1991; 4: 130-5.
Web of Science MedlineGoogle Scholar
4. Weintrub PS, Ulrich PP, Edwards JR, i in. . Wykorzystanie reakcji łańcuchowej polimerazy do wczesnego wykrywania zakażenia wirusem HIV u niemowląt z seropozytywnymi samicami HIV. AIDS 1991; 5: 881-4.
Crossref Web of Science MedlineGoogle Scholar
5. Roques P, Humbert M, Dormont D.. Diagnostyka noworodkowa zakażenia HIV. Lancet 1991; 338: 631.
Crossref Web of Science MedlineGoogle Scholar
6. Cassol SA, Lapointe N, Salas T, i in. . Rozpoznanie pionowej transmisji HIV-1 za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy i próbek osuszonego punktu krwi. J Acquir Immune Defic Syndr 1992; 5: 113-9.
Web of Science MedlineGoogle Scholar
7. Ehrnst A, Lindgren S, Belfrage E, i in. . Wewnątrzmaciczna i śródmózgowa transmisja wirusa HIV. Lancet 1992; 339: 245-6.
Crossref Web of Science MedlineGoogle Scholar
8. Comeau AM, Harris JA, Mclntosh K, Weiblen BJ, Hoff R, Grady GF. . Reakcja łańcuchowa polimerazy w wykrywaniu zakażenia HIV u seropozytywnych niemowląt: stosunek do stanu klinicznego i wieku oraz do wyników innych testów. J Acquir Immune Defic Syndr 1992, 5: 271-8.
Web of Science MedlineGoogle Scholar
9. Cassol S, Salas T, Arella M, Neumann P., Schechter MT, O Shaughnessy M.. Zastosowanie wysuszonych plamek krwi w wykrywaniu ludzkiego wirusa niedoboru odporności typu przez reakcję łańcuchową polimerazy. J Clin Microbiol 1991; 29: 667-71.
Web of Science MedlineGoogle Scholar
10. Hoff R, Berardi VP, Weiblen BJ, Mahoney-Trout L, Mitchell ML, Grady GF. . Seroprewalencja ludzkiego wirusa upośledzenia odporności u kobiet w wieku rozrodczym: ocena poprzez badanie próbek krwi od noworodków. N Engl J Med 1988; 318: 525-30.
Full Text Web of Science MedlineGoogle Scholar
(4)
[więcej w: terapia kranio sakralna, półpasiec czy jest zaraźliwy, olx ryki ]